В статье рассмотрены методики выделения ДНК из цианобактерии Arthrospira platensis. Для контроля чистоты и целостности исследуемой культуры использовался микроскопический и спектрофотометрический анализ. Эксперимент по выделению ДНК проводился по четырём различным протоколам: два с использованием колонок, кислотно-щелочной и с помощью набора «ДНК-экстран». Контроль чистоты выделенной ДНК и определение ее концентрации определялось с помощью спектрофотометра Implen NanoPhotometer N60. Наибольшая концентрация выделенной ДНК была получена с использованием кислотно-щелочного метода, при этом наиболее чистые препараты были выделены набором «ДНК-экстран» и на колонках «К-СОРБ».
Arthrospira platensis, выделение ДНК, спектрофотометрия
1. Ciferri O. Spirulina, the edible microorganism. Microbiol. Rev., 1983, vol. 47, pp. 551-558.
2. Reed R.H., Warr S.R.C., Richardson D.L., Moore D.J., Stewart W.D.P. Bluegreen algae (cyanobacteria): prospects and perspectives. Plan. and Soil, 1985, vol. 89, pp. 97-106.
3. Khan Z., Bhadouria P., Bisen P.S. Nutritional and therapeutic potential of Spirulina. Curr. Pharm. Biotechnology, 2005, vol. 5, pp. 373-379.
4. Brown I.I., Karakis S.G., Filippova T.O., Sarkisova S.A., Levitskiy A.P. The physiological effects of phycocyanin crude extract obtained from the G-27 overproducing strain of Spirulina platensis. 2nd European Workshop. Biotechnology of microalgae, 1995, pp. 70-73.
5. Harwood A.J. Basic DNA and RNA Protocols, Methods in Molecular Biology. New Jersey: Humana Press Totowa, 1994, vol. 58, pp. 3-7.
6. Moss D., Harbison S.A., Saul D.J. An Easily Automated, Closed-Tube Forensic DNA Extraction Procedure Using a Thermostable Proteinase.Int. J. Legal Med, 2003, vol. 117, pp. 340-349.
7. Milligan B.G. Total DNA isolation. Oxford University Press, 1998, pp. 29-64.
8. Lutz K., Wenqin W., Zdepski А., Michael Т. Isolation and analysis of high-quality nuclear DNA with reduced organellar DNA for plant genome sequencing and resequencing. BMC Biotechnol., 2011, vol. 11, p. 54.
9. Hong Chen, Murugesan Rangasamy, Sek Yee Tan, Haichuan Wang, В. D. Siegfried. Evaluation of Five Methods for Total DNA Extraction from Western Corn Rootworm Beetles. PLoS One, 2010, vol. 5(8).
10. Bravo D., Clari M., Costa E., Muñoz-Cobo B., Solano C., Remigia M.J., Navarro D.Comparative Evaluation of Three Automated Systems for DNA Extraction in Conjunction with Three Commercially Available Real-Time PCR Assays for Quantitation of Plasma Cytomegalovirus DNAemia in Allogeneic Stem Cell Transplant Recipients. J. Clin. Microbiol., 2011, vol. 49 (8), pp. 2899-2904.
