Модифицирован и оптимизирован метод определения жизнеспособности клеток в лиофилизованной БЦЖ вакцине путем измерения содержания внутриклеточного АТФ. Содержание АТФ определяли биолюминесцентным методом с использованием АТФ-реагента (люциферин/люциферазы). По сравнению с АТФ-методом, опубликованным ранее, мы изменили условия реконструкции и предварительной инкубации лиофилизованной БЦЖ вакцины, а также условия экстракции внутриклеточного АТФ. Это позволило сократить длительность анализа с 36 до 2-х часов, упростить процедуру анализа и сделать ее более пригодной для практического применения. Наблюдалась высокая корреляция между содержанием АТФ и величиной КОЕ, определенной стандартным методом посевов.
биолюминесценция, АТФ-метод, жизнеспособность клеток, лиофилизованная БЦЖ вакцина
1. Lomakina G.Yu., Modestova Yu.A., Ugarova N.N. Bioluminescence assay for cell viability. Biochemistry (Moscow), 2015, vol. 80, pp. 701-713.
2. Janaszek W., Aleksandrowicz J., Sitkiewicz D. The use of the firefly bioluminescent reaction for the rapid detection and counting of mycobacterium BCG. J. Biol. Stand., 1987, vol. 15, pp. 11-16.
3. Jensen S.E., Hubrechts P., Klein B.M., Haslow K.R. Development and validation of an ATP method for rapid estimation of viable units in lyophilized BCG Danish 1331 vaccine. Biologicals, 2008, vol. 36, pp. 308-314.
4. Ho M.M., Markey K., Rigsby P., Jensen S.E., Gairola S., Seki M., Castello-Branco L.R., Lopez-Vidal Y., Knezevic I., Corbel M.J. Report of an international collaborative study to establish the suitability of using modified ATP assay for viable count of BCG vaccine. Vaccine, 2008, vol. 26, pp. 4754-4757.
