Фермент азурофильных гранул нейтрофилов - миелопероксидаза (МПО), катализирующая образование гипогалоидных кислот, вовлечена в развитие многих заболеваний, среди которых сердечно-сосудистые, нейродегенеративные, онкологические и др. Актуальной является разработка современных методов обнаружения продуцируемых МПО активных форм галогенов в различных биологических жидкостях. В данной работе показана возможность использования красителя целестинового синего В для регистрации синтеза гипогалоидных кислот и их производных при активации нейтрофилов агонистами различной природы - форбол-12-миристат-13-ацетатом, N- формил-метионил-лейцил-фенилаланином, а также лектинами различной углеводной специфичности: из зародышей пшеницы ( Triticum vulgaris агглютинин), коры караганы древовидной Caragana arborescens агглютинин), коры бузины черной ( Sambucus nigra агглютинин), сои ( Glycine hispida агглютинин), канавалии ( Canavalia ensiformis агглютинин) и семян фасоли ( Phaseolus vulgaris агглютинин). Данный метод может быть использован при разработке подходов для контроля активности МПО и исследовании функционального состояния нейтрофилов.
целестиновый синий B, HOCl, миелопероксидаза, НАДФН-оксидаза, нейтрофилы, флуоресценция
1. Зак К.П. Роль нейтрофильных лейкоцитов в патогенезе сахарного диабета 1-го типа у человека (аналитический обзор с включением собственных данных). Международный эндокринологический журнал, 2016, № 2, вып. 74, с. 130-139. [Zak K.P. The role of neutrophilic leukocytes in the pathogenesis of type 1 diabetes mellitus in humans (an analytical review with the inclusion of own data). Mezhdunarodnyi endokrinologicheskiy zhurnal, 2016, no. 2, vol. 74, pp. 130-139. (In Russ.)]
2. Мальцева В.Н., Сафронова В.Г. Неоднозначность роли нейтрофила в генезе опухоли. Цитология, 2009, т. 51, № 6, с. 467-474. [Maltseva V.N., Safronova V.G. Ambiguity of the role of neutrophil in tumor genesis. Tsitologiya, 2009, vol. 51, no. 6, pp. 467-474. (In Russ.)]
3. Lau D., Baldus S. Myeloperoxidase and its contributory role in inflammatory vascular disease. Pharmacology. Therapeutics, 2006, vol. 111, no. 1, pp. 16-26.
4. Huang J., Milton A., Arnold R.D., Huang H., Smith F., Panizzi J.R., Panizzi P. Methods for measuring myeloperoxidase activity toward assessing inhibitor efficacy in living systems. Journal of leukocyte biology, 2016, vol. 99, no. 4, pp. 541-548.
5. Соколов А.В., Костевич В.А., Васильев В.Б., Панасенко О.М. Кинетический метод определения галогенирующей активности миелопероксидазы. Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: Тез. докл. Междунар. науч. конф., сб. ст.: в 2 ч. Ч. 2, Минск, 2012, c. 272-274.
6. Sokolov A.V., Kostevich V.A., Kozlov S.O., Donskyi I.S., Vlasova I.I., Rudenko A.O., Zakharova E.T., Vasilyev V.B., Panasenko O.M. Kinetic method for assaying the halogenating activity of myeloperoxidase based on reaction of celestine blue B with taurine halogenamines. Free Radical Research, 2015, vol. 49, no. 6, pp. 777-789.
7. Sheppard F.R., Kelher M.R., Moore E.E., McLaughlin N.J., Banerjee A., Silliman C.C. Structural organization of the neutrophil NADPH oxidase: phosphorylation and translocation during priming and activation. Journal of leukocyte biology, 2005, vol. 78, no. 5, pp. 1025-1042.
8. Nagaji J. The role of protein kinase C and [Ca2+]i in superoxide anion synthesis and myeloperoxidase degranulation of human neutrophils. The Kurume medical journal, 1999, vol. 46, no. 3-4, pp. 157-162.
9. Abdel-Latif D., Steward M., Macdonald D.L., Francis G.A., Dinauer M.C., Lacy P. Rac2 is critical for neutrophil primary granule exocytosis. Blood, 2004, vol. 104, no 3, pp. 832-839.
10. Тимошенко А.В. Применение эндогенных лектинов в клинической диагностике. Медицинские новости, 1997, № 4, с. 16-20. [Timoshenko A.V. The use of endogenous lectins in clinical diagnostics. Meditsinskiye novosti, 1997, no. 4, pp. 16-20. (In Russ.)]
11. Gorudko I.V., Mukhortava A.V., Caraher B., Ren M., Cherenkevich S.N., Kelly G.M., Timoshenko A.V. Lectin-induced activation of plasma membrane NADPH oxidase in cholesterol-depleted human neutrophils. Archives of biochemistry and biophysics, 2011, vol. 516, no. 2, pp. 173-181.
12. Pereira-da-Silva G., Caroline Carvalho F., Cristina Roque-Barreira M. Neutrophil activation induced by plant lectines: modulation of inflammatory processes. Inflammation & Allergy-Drug Targets, 2012, vol. 11, no. 6, pp. 433-441.
13. Timoshenko A.V., Kayser K., Gabius H.J. Lectin-triggered superoxide/H2O2 and granule enzyme release from cells. Methods in Molecular Medicine, 1998, no. 9, pp. 441-445.
