Исследованы механизмы воздействия УФ-света в диапазоне доз 151-6040 Дж/м2 на трипсин и коллагеназу, свободные и иммобилизованные на матрице кислоторастворимых среднемолекулярного (200 кДа) и высокомолекулярного (350 кДа) хитозанов. Ферментативная активность молекул свободных протеаз под воздействием УФ-света подвержена изменению в большей степени, чем в иммобилизованном состоянии. Иммобилизация приводит к повышению стабильности гетерогенных биокатализаторов по отношению к УФ-облучению по сравнению со свободными энзимами, возможно, за счет образования комплекса фермент-носитель, белки становятся более устойчивыми к такому физическому агенту как УФ-свет. Приведенные в работе данные свидетельствуют о фотопротекторном эффекте матрицы хитозана, который может быть обусловлен следующими причинами: молекулы трипсина и коллагеназы при взаимодействии с матрицей хитозана образуют фоторезистентные комплексы; молекулы хитозана экранируют активные фотопродукты свободнорадикальной природы, предотвращая фотоокисление определенного числа аминокислот указанных ферментов при воздействии УФ-облучения.
УФ-излучение, трипсин, коллагеназа, иммобилизация, хитозан
1. Пиняскина Е.В. Реактивирующее и протекторное действие красного света на дрожжевые клетки, инактивированные УФ-излучением. Известия Самарского научного центра Российской академии наук, 2011, т. 13, № 1 (5), c. 1137-1139. @@[Pinyaskina E.V. The reactive and protective effect of red light on yeast cells inactivated by UV radiation. Bulletin of the Samara Scientific Center of the Russian Academy of Sciences, 2011, vol. 13, no. 1 (5), pp. 1137-1139. (In Russ.)]
2. Реброва Г.А., Василевский В.К., Ребров Л.Б., Осипова Л.А., Быков В.А. Биохимическое и фотометрическое исследование модификации структуры коллагена при УФ-облучении. Биомедицинская химия, 2007, т. 53, № 4, с. 442-453. @@[Rebrova G.A., Vasilevskij V.K., Rebrov L.B., Osipova L.A., Bykov V.A. Biochemical and photometric studies of the modification of collagen structure under UV irradiation. Biomedicinskaya himiya, 2007, vol. 53, no. 4, pр. 442-453. (In Russ.)]
3. Костина Н.Ю., Горшкова М.Ю., Изумрудов В.А. Водорастворимые полиплексы модифицированного хитозана. Высокомолекулярные соединения. Серия А, 2011, т. 53, № 10, с. 1767-1775. @@[Kostina N.Yu., Gorshkova M.Yu., Izumrudov V.A. Water-soluble polyplexes of modified chitosan. High molecular weight compounds. Series A, 2011, vol. 53, no. 10, pp. 1767-1775. (In Russ.)]
4. Jung W., Winter H. Considerations for the Use of Clostridial Collagenase in Clinical Practice. Journal of Clinical Drug Investigation, 1998, vol. 15, no. 3. DOI:https://doi.org/10.2165/00044011-199815030-00009.
5. Peacock Jr. E.E., Collagenolysis M.D. The Other Side of the Equation World. World Journal of Surgery, 1980, vol. 4. DOI:https://doi.org/10.1007/BF02393385.
6. Watanabe K. Collagenolytic proteases from bacteria. Journal of Applied Microbiology and Biotechnology, 2004, vol. 63. DOI:https://doi.org/10.1007/s00253-003-1442-0.
7. Холявка М.Г., Артюхов В.Г., Сазыкина С.М. Исследование процессов УФ-модификации свободного и иммобилизованного трипсина. Радиационная биология. Радиоэкология, 2017, т. 57, № 1, с. 66-70. DOI:https://doi.org/10.7868/S0869803117010064. @@[Holyavka M.G., Artyuhov V.G., Sazykina S.M. Investigation of the processes of UV modification of free and immobilized trypsin. Radiation biology. Radioecology, 2017, vol. 57, no. 1, pp. 66-70. (In Russ.)]
8. Логинова О.О., Холявка М.Г., Артюхов В.Г., Беленова А.С. Разработка методики получения гетерогенного биокатализатора на основе трипсина, иммобилизованного на матрице хитозана. Фундаментальные исследования, 2013, № 11-3, c. 484-487. @@[Loginova O.O., Holyavka M.G., Artyuhov V.G., Development of a method for producing a heterogeneous biocatalyst based on trypsin immobilized on a chitosan matrix. Basic Research, 2013, no. 11-3, pp. 484-487. (In Russ.)]
9. Логинова О.О., Холявка М.Г., Артюхов В.Г., Беленова А.С. Подбор методики количественного определения трипсина, иммобилизованного на матрице хитозана, и его каталитической активности. Вестн. ВГУ. Серия: “Химия. Биология. Фармация”, 2013, № 2, с. 116-119. @@[Loginova O.O., Holyavka M.G., Artyuhov V.G., Belenova A.S. Selection of methods for the quantitative determination of trypsin immobilized on a chitosan matrix and its catalytic activity. Vestn. VSU. Series: “Chemistry. Biology. Pharmacy”, 2013, no. 2, pp. 116-119. (In Russ.)]
