Воронеж, Воронежская область, Россия
Воронеж, Воронежская область, Россия
Воронеж, Воронежская область, Россия
Воронеж, Воронежская область, Россия
В работе изучены изменения маркерных показателей апоптотической гибели клеток: уровня функциональной активности инициирующих каспаз-8, -9, -12, мембранных рецепторов смерти Fas, внутриклеточных активных форм кислорода, цитозольного кальция, митохондриального потенциала лимфоцитов периферической крови доноров, индуцированные воздействием пероксида водорода в конечных концентрациях 10-6 и 10-5 моль/л. Обнаружена активация инициирующей каспазы-8, ассоциированной с мембранными рецепторами смерти Fas, после воздействия на лимфоциты пероксида водорода в концентрации 10-6 моль/л. Выявлено значительное повышение функциональной активности инициирующей каспазы-9, уровня Fas-рецепторов и внутриклеточных активных форм кислорода, а также снижение концентрации цитозольного кальция и величины мембранного потенциала митохондрий через 1 и 2 ч после модификации клеток пероксидом водорода в концентрации 10-5 моль/л по сравнению с таковыми для интактных иммуноцитов. Установлено, что апоптоз лимфоцитов в условиях воздействия экзогенного пероксида водорода реализуется с участием рецепторопосредованного каспазного, митохондриального (с активацией каспазы-9) и р53-зависимого механизмов. Выявлено защитное действие ресвератрола (10-6 моль/л) на лимфоциты после воздействия пероксида водорода (10-5 моль/л), которое обусловлено его способностью снижать уровень активных форм кислорода в интактных и модифицированных пероксидом водорода иммуноцитах, а также дезактивировать пероксид водорода.
апоптоз, лимфоциты, пероксид водорода, каспазы
1. Nagata S., Masato Tanaka. Programmed cell death and the immune system. Nature Reviews Immunology, 2017, vol. 17, no. 5, pp. 333-340, doi:https://doi.org/10.1038/nri.2016.153.
2. Savitskaya M.A., Onishchenko G.E. Mechanisms of Apoptosis. Biochemistry (Mosc.), 2015, vol. 80, no. 11, pp. 1393-1405, doi:https://doi.org/10.1134/S0006297915110012.
3. Наквасина М.А., Артюхов В.Г. Механизмы клеточной гибели: апоптоз, аутофагия, некроз. Учебное пособие. Воронеж: Издательский дом ВГУ, 2019, 164 с.
4. Mates J.M., Sanchez-Jimenez F.M. Role of reactive oxygen species in apoptosis: implications for cancer therapy. The International Jornal of Biochemistry & Cell Biology, 2000, vol. 32, pp. 157-170, doi:https://doi.org/10.1016/s1357-2725(99)00088-6.
5. Riazantseva N.V., Novitskii V.V., Chasovskikh N.Iu., Kaigorodova E.V., Starikova E.G., Starikov Iu.V., Radzivil T.T., Krat N.V. The role of redox-dependent signal systems in the regulation of apoptosis under oxidative stress condition. Tsitologiia, 2009, vol. 51, no. 4, pp. 329-334. (In Russ.)
6. Cherenkevich S.N., Martinovich G.G., Martinovich I.V., Gorudko I.V., Shamova E.V. Redox regulation of cellular activity: concepts and mechanisms. Vescі NAN Belarusі. Ser. biyal. Navuk, 2013, vol. 1, pp. 92-108. (In Russ.)
7. Nadeev A.D., Zinchenko V.P., Kudryavtsev I.V., Serebriakova M.K., Avdonin P.V., Goncharov N.V. Dual proapoptptic and pronecrotic effect of hydrogen peroxide on human umbilical vein endothelial cells. Cell and Tissue Biology, 2015, vol. 57, no. 12, pp. 909-916, doi:https://doi.org/10.1134/S1990519X16020097.
8. Artyukhov V.G., Trubitsyna M.S., Nakvasina M.A., Solov′eva E.V., Lidokhova O.V. Ways of realizing apoptosis of human lymphocytes induced by UV-light and reactive oxygen species. Radiats Biol Radioecol, 2011, vol. 51, no. 4, pp. 425-443. (In Russ.)
9. Artyukhov V.G., Trubitsyna M.S., Nakvasina M.A., Solov′eva E.V. DNA Fragmentation of Human Lymphocytes in Dynamics of Development of Apoptosis Induced by Action of UV Radiation and Reactive Oxygen Species. Cell and Tissue Biology, 2011, vol. 5, no. 2, pp. 127-135, doi:https://doi.org/10.1134/S1990519X11020039.
10. Artyukhov V.G., Trubitsyna M.S., Nakvasina M.A., Lidokhova O.V., Ryazantsev S.V. The ways for realization of human lymphocyte apoptosis, induced by hydrogen peroxide. Voprosy biologicheskoj, medicinskoj i farmacevticheskoj himii, 2013, no. 7, pp. 7-16. (In Russ.)
11. Nakvasina M.A., Popova L.I., Lidokhova O.V., Artyukhov V.G. Modulation of Structural and Functional Properties of Human Lymphocytes by Reactive Oxygen Species. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2019. vol. 166, no. 4, pp. 481-486, doi:https://doi.org/10.1007/S10517-019-04377-4.
12. Клаус Дж. Лимфоциты. Методы. Москва, Мир, 1990, 395 с.
13. Kaufmann S., Lee Sun-Hee, Meng X., Loegering D., Kottke T., Heinzing A.J., Ruchaud S., Samejima K., Earnshaw W. Apoptosis-associated caspase activation assays. Methods, 2008, vol. 44, pp. 262-272, doi:https://doi.org/10.1016/j.ymeth.2007.11.005.
14. Hirst R.A., Harrison C., Hirota K., Lambert D.G. Measurement of [Ca²+]i in whole cell suspensions using fura-2. Methods Mol. Biol., 2005, vol. 312, pp. 37-45, doi:https://doi.org/10.1385/1-59259-949-4:037.
15. Rastogi R.P., Singh S.P., Hader D.P., Sinha R.P. Detection of reactive oxygen species (ROS) by the oxidant-sensing probe 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate in the cyanobacterium Anabaena variabilis PCC 7937. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2010, vol. 397, no. 3, pp. 603-607, doi:https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2010.06.006.
16. Kudriavtsev I.V., Golovkin A.S., Zurochka A.V., Khaidukov S.V. Modern technologies and approaches to apoptosis studies in experimental biology. Medicinskaya immunologiya, 2012, vol. 14, no. 6, pp. 461-482. (In Russ.)
17. Julien O., Wells I.A. Caspases and their substrates. Cell Death and Differentiation. Advance online publication. 2017, doi: 10/1038/cdd.2017.44.
18. Green D.R., Llambi F. Cell death signaling. Cold Spring Harb Perspect Biol., 2015, doi:https://doi.org/10.1101/cshperspect.a006080.
19. Szegezdi E., Fitzgerald U., Samali A. Caspase-12 and ER-stress-mediated apoptosis: The story so far. Annals of the New York Academy of Sciences, 2003, dec., vol. 1010, pp. 186-194, doi:https://doi.org/10.1196/annals.1299.032.
