В настоящей работе с помощью метода водно-этанольной экстракции из микросом печени крысы выделен и очищен ион-транспортирующий белок-канал. Изучены его электрофизиологические и регуляторные свойства. Показано, что минимальная величина канала составляет 10pS. При реконструкции в БЛМ данного белка, формируются каналы с многоуровневой проводимостью. Проводимость данного белка может распадаться на различные уровни. Величина проводимости кластеров кратна величине проводимости одиночного белка - канала. Вольтамперная характеристика (ВАХ) полученная в диапазоне напряжения от -100 mV до 100 mV свидетельствует о потенциал - чувствительности обнаруженного микросомального белка-канала. Полученные данные свидетельствуют о том, что белок выделенный из микросом не является селективным по К+, что возможно связанно с местом его локализации и его участии в процессах опосредованных не только транспортом калия но и других одновалентных ионов. Обнаруженные эффекты ATP и ADP на выделенный из микросом гепатоцитов крысы канал, позволяют относить его к семейству АТP-чувствительных белков. Ингибирование изучаемого белка-канала 5-ГД, указывает на то, что митоКАТP подобные белки, помимо митохондрий могут быть локализованы и в эндоплазматическом ретикулуме.
митохондрии, микросомы, БЛМ, КАТР-каналы, 5- ГД
1. Foster M.N., Coetzee W.A. KATP Channels in the Cardiovascular System. Physiol Rev., 2016, vol. 96, iss. 1, pp. 177-252.
2. Babenko A.P., Gonzalez G., Aguilar-Bryan L., Bryan J. Reconstituted human cardiac KATP channels:functional identity with the native channels from the sarcolemma of human ventricular cells. Circ Res.,1998, vol. 83, pp. 1132-1143.
3. Bao L., Kefaloyianni E., Lader J., Hong M., Morley G., Fishman G.I., Sobie E.A., Coetzee W.A. Unique properties of the ATP-sensitive K+ channel in the mouse ventricular cardiac conduction system. Circ Arrhythm Electrophysiol., 2011, vol. 4, pp. 926-935.
4. Baron A., van Bever L., Monnier D., Roatti A., Baertschi A.J. A novel KATP current in cultured neonatal rat atrial appendage cardiomyocytes. Circ Res., 1999, vol. 85, pp. 707-715.
5. Inagaki N., Gonoi T., Clement J.P., Wang C.Z., Aguilar-Bryan L., Bryan J., Seino S. A family of sulfonylurea receptors determines the pharmacological properties of ATP-sensitive K+ channels. Neuron, 1996, vol. 16, pp. 1011-1017.
6. Foster D.B., Ho A.S., Rucker J., Garlid A.O., Chen L., Sidor A., Garlid K.D., O Rourke B. Mitochondrial ROMK channel is a molecular component of MitoKATP. Circ Res., 2012, vol. 111, pp. 446-454.
7. Kuum M., Veksler V., Kaasik A. Potassium fluxes across the endoplasmic reticulum and their role in endoplasmic reticulum calcium homeostasis. Cell Calcium., 2015, vol. 58, iss. 1, pp. 79-85.
8. Checchetto V., Teardo E., Carraretto L., Leanza L., Szabo I. Physiology of intracellular potassium channels: A unifying role as mediators of counterion fluxes? Biochim Biophys Acta., 2016, vol. 1857, iss. 8, pp. 1258-66.
9. Laskowski M., Augustynek B., Kulawiak B., Koprowski P., Bednarczyk P., Jarmuszkiewicz W., Szewczyk A. What do we not know about mitochondrial potassium channels? Biochim Biophys Acta., 2016, vol. 1857, iss. 8, pp.1247-57.
10. Salari S., Ghasemi M., Fahanik-Babaei J., Saghiri R., Sauve R., Eliassi A. Evidence for a KATP Channel in Rough Endoplasmic Reticulum (rerKATPChannel) of Rat Hepatocytes. PLoS One, 2015, vol. 10, iss. 5, e0125798.
11. Schnitzler M.M., Derst C., Daut J., Preisig-Muller R. ATP-sensitive potassium channels in capillaries isolated from guinea-pig heart. J Physiol., 2000, vol. 525, pp. 307-317.
12. Mironova G., Grigoriev S., Skarga Y., Negoda A., Kolomytkin O. ATP-dependent potassium channel from rat liver mitochondria: inhibitory analysis, channel clusterization. Membr. Cell. Biol., 1997, vol. 10, pp. 583-591.
13. Shigaeva M.I., Talanov E.Iu., Venediktova N.I., Murzaeva S.V., Mironova G.D. A role for calreticulin in functioning of mitochondrial ATP-dependent potassium channel. Biofizika, 2014, vol. 59, iss. 5, pp. 887-94.
14. Pavlik L.L., Gritsenko E.N., Moshkov D.A., Mikheeva I.B., Talanov E.Iu., Mironova G.D. Localization in a cell of a protein forming the ATP-dependent potassium-selective channels in the bilayer lipid membrane. An ultrastructural study, Biofizika, 2010, vol. 55, iss. 5, pp. 809-13.
