В работе изучена возможность применения стабильных радикалов для определения содержания фенолов в реакционной смеси с помощью окислительно-восстановительного титриметрического анализа. Разработана процедура получения ABTS+•-радикала в реакции лакказного окисления ABTS с последующим выделением катион-радикала гель-хроматографией на колонке с сефадексом G-10. С помощью различных подходов определен коэффициент экстинкции для ABTS+•-радикала, который составил (3,3 ± 0,2)·104 л∙(моль∙см)-1. В качестве реагента для стандартизации раствора ABTS+•-радикала и •DPPH предложена аскорбиновая кислота. Показана применимость окислительно-восстановительного титрования с использованием катион-радикала ABTS и •DPPH для регистрации кинетики расходования многоатомного фенола в процессе его окисления в присутствии лакказы Trametes versicolor .
стабильные радикалы, лакказа, фенолы, аскорбиновая кислота, окисление, спектрофотометрия, окислительно-восстановительное титрование
1. Куликова Н.А. и др. Использование базидиальных грибов в технологиях переработки и утилизации техногенных отходов: фундаментальные и прикладные аспекты (обзор). Прикладная биохимия и микробиология, 2011, т. 47, с. 619-634. @@Kulikova N.A. et al. The use of basidiomycetes in technologies for processing and utilization of technogenic waste: fundamental and applied aspects (review). Applied Biochemistry and Microbiology, 2011, vol. 47, pp. 619-634. (In Russ.)
2. Veda P Pandey et al. A Comprehensive Review on Function and Application of Plant Peroxidases [Text]. Biochemistry and Analytical Biochemistry, 2017, vol. 6, no. 1, pp. 1-16. doi:https://doi.org/10.4172/2161-1009.1000308
3. Diana M. Mate, Alcalde M. Laccase: a multi-purpose biocatalyst at the forefront of biotechnology. Microbial Biotechnology, 2017, vol. 10, no. 6, pp. 1457-1467. doi:https://doi.org/10.1111/1751-7915.12422
4. Santos-Sanchez N.F., Salas-Coronado R., Villanueva-Cañongo C., Hernández-Carlos B. Antioxidant Compounds and Their Antioxidant Mechanism.IntechOpen, 2019. doi:https://doi.org/10.5772/intechopen.85270
5. Roberta Re et al. Antioxidant Activity Applying an Improved ABTS Radical Cation Decolorization Assay. Free Radical Biology & Medicine, 1999, vol. 26, pp. 1231-1237.
6. Волков В.А., Дорофеева Н.А., Пахомов П.М. Кинетический метод анализа антирадикальной активности экстрактов растений. Химико-фармацевтический журнал, 2009, т. 43, № 6, c. 27-31. @@Volkov V.A., Dorofeeva N.A., Pakhomov P.M. Kinetic method for the analysis of antiradical activity of plant extracts. Pharmaceutical Chemistry Journal, 2009, vol. 43, no. 6, pp. 27-31. (In Russ.) doi:https://doi.org/10.30906/0023-1134-2009-43-6-27-31
7. Osman A.M., Wong K.K.Y., Fernyhough A. ABTS radical-driven oxidation of polyphenols: isolation and structural elucidation of covalent adducts. Biochem Biophys Res Commun., 2006, vol. 346, no. 1, pp. 321-329. doi:https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2006.05.118
8. Shendrik A.N., Odaryuk I.D., Kanibolotska L.V. et al.Radical formation during phenol oxidation in aqueous media [Text].Int. J. Chem. Kinet., 2012, vol. 44, no. 6, pp. 414-422. doi:https://doi.org/10.1002/kin.20592
9. Gramss G. Reappraising a Controversy: Formation and Role of the Azodication (ABTS2+) in the Laccase-ABTS Catalyzed Breakdown of Lignin. Fermentation, 2017, vol. 3, no. 27, pp. 1-18. doi:https://doi.org/10.3390/fermentation3020027
10. Osman A.M. Multiple pathways of the reaction of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical (DPPH·) with (+)-catechin: evidence for the formation of a covalent adduct between DPPH·and the oxidized form of the polyphenol. Biochem Biophys Res Commun., 2011, vol. 412, pp. 473-478. doi:https://doi.org/10.1016/j.bbrc. 2011.07.123
11. Досон Р. и др. Справочник биохимика: Пер. с англ. М.: Мир, 1991, 544 с. @@Dawson R. et al. Biochemist's Handbook: Per. from English M.: Mir, 1991, 544 p. (In Russ.)
12. Branchi B., Galli C., Gentili P. Kinetics of oxidation of benzyl alcohols by the dication and radical cation of ABTS.Comparison with laccase-ABTS oxidations: an apparent paradox. Org. Biomol. Chem., 2005, vol. 3, pp. 2604-2614. doi:https://doi.org/10.1039/B504199F
